造成室內空氣污染的原因是多方面的,污染物也是多種多樣的,今天潤德凈化說說關于PCR實驗室凈化中空氣污染物類型。目前我國室內空氣污染主要有:
1)CO,NO2,SO2,甲醛,多環芳烴和各種燃料燃燒,食用油煙和吸煙等產生的細顆粒物。室內淋浴和加濕空氣產生的鹵代烴等化學污染物;
2)建筑、裝飾材料、家具和實驗室化學品釋放的甲醛、苯、等有害氣體;
3)實驗室電器和某些辦公設備導致的電磁輻射等物理污染和臭氧等;
為避免提取的核酸在柜內反復循環,造成標本之間的交叉污染,出現假陽性結果,該區域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區垂直氣流全部來自實驗室,排風經過過濾器(www.rfilter.com)過濾后直接排至室外,不允許回到安全柜和實驗室中。
根據經驗,如果實驗室內配備生物安全柜,每配備一臺,實驗室的面積增加10m2;標本制備區的面積宜在25m2~30m2之間。本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。
擴增室該區域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。
在巢式PCR測定中,通常在輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區內進行。
擴增室主要配備PCR實驗室的核心儀器PCR儀,本文實例中使用了ABI7500和ABI9700兩種PCR儀。
在實驗室建造過程中,需要給PCR儀配備專門的UPS電源,以保證其正常工作。該區面積控制在15m2~20m2。
本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。建議采用5~10Pa壓差,在控制上比較容易實現。
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PCR實驗室功能分區
PCR負壓實驗室按照工作流程劃分為4個主要區域:1試劑準備區、2標本制備區、3產物擴增區、4產物分析區,以及相關緩沖區及走廊,詳見圖1。根據相關實驗室建設規范要求,PCR各區域必須相互獨立,每個單獨實驗區設有專門的緩沖室給工作人員更衣。設置傳遞窗,雙門互為連鎖,并設置紫外線燈,避免污染,試劑、樣本嚴格按單向流線傳遞。