PCR不同區域可合并情況(一)
場景:使用實時熒光PCR儀
依據:關于印發《機構臨床基因擴增管理辦法》的通知;機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛辦醫政發〔2010〕194號
合并:擴增區、擴增產物分析區可合并
PCR不同區域可合并情況(二)
場景:采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀
依據:關于印發《機構臨床基因擴增管理辦法》的通知;機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛辦醫政發〔2010〕194號
合并:標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。
輔料的質檢應結合實際工作中可能用到的場景,并非越苛刻越好,需要每個實驗室結合自身情況來設計和調整文中提到的參數。
1.離心管
(1)滲漏密閉性:將n個離心管加入半量墨汁,蓋好蓋子后放入水中,浸泡30min,沒有墨汁滲出為合格。
(2)離心密閉性:將n個離心管加入半量純水,放入離心機,10000 rpm,30min,管蓋未崩開未漏液為合格。
(3)熱密閉性:將n個離心管加入半量純水,蓋好蓋子稱重后放入金屬浴中,65℃或90℃(巴氏消毒),30min,再進行稱重,離心管未變形,管蓋未崩開未漏液,前后重量未變化為合格。
(4)冷密閉性:將n個離心管加入半量純水,放入-20℃冰箱,24h,離心管未變形,管蓋未崩開未漏液為合格。
(5)污染物質檢:將n個離心管分別加入半量陰性純水,蓋好蓋子渦旋1 min后靜置5min,吸取純水作為模板進行擴增,qPCR無擴增為合格。
(6)抑制物質檢:將n個離心管分別加入弱陽性質控物,室溫靜置5min,然后進行提取;RNA核酸,DNA核酸,室溫靜置5min,作為模板進行擴增,qPCR擴增未被抑制為合格。
故障現象一:分機聽見主機聲音,但主機聽不見分機聲音。
分析與維修:首先劃分為兩種情況:
(1)所有分機均可聽見主機聲音,但主機連一臺分機的聲音都聽不到;
(2)所有分機都可聽見主機聲音,但主機只有某臺分機聲音聽不見。
通過試驗,判斷故障到底屬于上面兩種情況中的哪一種,如果為種情況,就是主機話筒或話筒線故障,把話筒線兩端的插頭從卡座中撥出,再重新插回,仍然沒有聲音,然后打開話筒外殼,觀察里面的連線時發現內部磁電式的一條連接導線從焊接處脫出,焊回該條導線后即可聽見聲音;
如果為第二種情況,則有三種可能引起故障的原因:
(1)話筒內部連線斷裂或損壞;
(2)分機麥克風(MIC)壞;
(3)分機音頻放大三極管Q4(型號:9014)或Q5型號:9013)損壞。
先打開話筒外殼,檢查發現導線連接牢固,用萬用表測量亦正常,把故障分機與臨近病房的電源插座和按鈕(內置MIC插座相連,故障依舊,說明與分機MIC無關,焊出電路板上音頻放大管Q4、Q5檢查,發現Q4c、e 極間擊穿,更換Q4,恢復正常。
故障現象二:主機聽見分機聲音,分機聽不見主機聲音。
分析與維修:該故障也可分為兩種情況:
(1)所有分機聽不見主機聲音;
(2)單臺分機聽不見主機聲音。
種情況故障點在主機上,著重檢查主機電話機及連線,拆開話筒,可見話筒內的麥克風焊接處斷開,用烙鐵將斷線焊牢;
第二種情況故障出在分機上,著重檢查電路板上的揚聲器控制繼電器Jl,在Jl線圈兩端加12VDC電壓,測量JK觸點,發現觸點接觸不良,更換新的繼電器,故障消失。
故障現象三:按下分機呼叫按鈕,紅燈不亮。
分析與維修:分機盒上的紅色指示燈代表正在呼叫。按復位鈕,紅燈亮,表明指示燈本身無問題,用萬用表測量呼叫按鈕薄膜開關,發現開關斷開,肉眼可見開關有碳化痕跡,可以肯定開關己壞,更換新的薄膜開關,機械恢復正常。