PCR實驗室中的氣溶膠污染來源于兩個過程:樣本制備過程和PCR擴增過程。
在樣本制備過程中,樣本液體面與空氣摩擦就可形成氣溶膠,在操作時比較劇烈地搖動反應管、開蓋時、吸樣時及加樣器的反復吸樣都可能形成氣溶膠而污染;PCR擴增過程可以引起實驗室中擴增產物的累積,通常一次典型的PCR擴增可以產生109拷貝的靶序列,如果氣溶膠化,甚至的氣溶膠都會含有106拷貝的擴增產物。
如果不加以控制,在短期內累積的氣溶膠化擴增產物就會污染實驗室中的試劑、儀器設備和通風系統,造成嚴重的實驗室污染,導致檢驗樣本出現假陽性結果,使臨床做出錯誤的判斷和決策,進而引發后續一系列的事故和恐慌。
臨床基因擴增檢驗實驗室需要依據《機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》、《實驗室生物安全通用要求》、《生物安全實驗室建筑技術規范》等相關規定進行規劃建設。
1、二級生物安全實驗室的裝修
根據《人間的病原微生物名錄》,PCR實驗室所操作致病性生物因子大多屬于第二類病原微生物,實驗活動所需生物安全實驗室級別的生物危害等級為BSL-2。列舉裝修要點如下:
1、實驗室墻壁、頂板和地板應當光滑、易清潔、防滲漏并耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑,不得在實驗室內鋪設地毯和懸掛窗簾。實驗室的墻體,包括頂棚,應結構牢固、氣密性好、所有陰角采用圓弧形線條過渡;墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;墻體和吊頂建議使用彩鋼板。
2、地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
3、燈具要選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的特點。實驗室應設應急照明裝置,同時考慮合適的安裝位置,以保證人員安全離開實驗室。
4、有可靠的電力供應和應急照明。每個房間必須裝有紫外線殺菌燈,殺菌燈的安裝高度在1.8~2.1m之間。
5、傳遞窗內部安裝有紫外燈,供消毒用。
6、應配備足夠的固定電源插座,避免多臺設備使用共同的電源插座。應有可靠的接地系統,應在關鍵節點安裝漏電保護裝置或監測報警裝置。
7、實驗室臺(桌)柜和座椅等應穩固和堅固,邊角應圓滑。實驗臺面應防水,并能耐受熱、、酸堿、消毒劑及其他化學劑。一般采用環氧樹脂臺面。
8、實驗臺中的櫥柜和實驗臺應牢固,實驗臺、柜和其他設備之間應保持一定距離,以便清潔。
9、實驗室門為凈化門,應有可視窗并帶自動閉門器,實驗室的門與門不能相對開啟,必須錯位開啟。并達到適當的防火等級,門鎖及門的開啟方向應不妨礙室內人員逃生。
對無塵車間塵埃粒子數的控制,對無塵車間內風淋室的環境控制及日常養護十分注重,空氣凈化系統起著非常關鍵的作用。那么無塵車間空氣清潔要點是什么呢?
1、無塵車間內的作業人員要嚴格按照無塵車間的操作規則來工作。無塵車間的門窗應是隨時處于關閉狀態的,無塵車間與非無塵車間之間人員和物品的傳遞應有緩沖區,并有風浴設備來阻止氣流的對流,與生產無關的人員不行進入無塵車間。
2、無塵車間的換氣次數和空調凈化系統的送風量是維持無塵車間正壓和潔凈度的主要內因,但是它受凈化系統中各級過濾器的終阻力的制約。
3、無塵車間內的設備要求定期、定時、定人進行清潔維護,清潔中所用的物料和清潔液體是否符合潔凈室管理的規定等。
4、對使用者來講無塵車間的潔凈度是他們關心的焦點,運行中的無塵車間污染源是人和進入無塵車間的物品,生產中產生的塵粒也是影響室內潔凈度的另一原因。
5、和物流的合理分流對維護風淋房內的潔凈度有著重要的意義。人在進無塵車間前是否更衣吹淋,著裝是否符合潔凈管理規范的標準,一些生產工藝特殊的對潔凈度要求高的人員在進入前還要進行洗浴;物在進無塵車間前是否更換包裝吹淋,更換后的物料是否符合潔凈室標準等等。