1、實驗應在超凈工作臺或者生物安全柜內進行;
2、實驗的過程中選擇尺寸的手套并能及時更換,在進出不同實驗區域或進行模板操作后都應更換實驗服、口罩、帽子及手套,以避免不同實驗區交叉污染;
3、裝有PCR試劑的反應管在打開之前應先瞬時離心,將管壁及管蓋上的液體離至管底,降低污染手套或加樣器的風險;謹慎開啟反應管,防止管內液體濺出或形成氣溶膠導致污染;需要高溫加熱的樣本,可采用封口膜進行PCR管蓋密封,避免管蓋應受熱而發生彈開;
4、吸加試劑和模板的操作應嚴格按照規范要求進行,遵守“慢吸快打”原則,盡量一次性完成,忌多次抽吸,以避免氣溶膠產生的交叉污染;
5、PCR試劑建議小量分裝,以減少反復凍融、重復取樣次數和反復使用過程中的試劑污染;多樣本PCR反應時,先配制反應混合液分裝至反應管中,加入樣本核酸,請勿同時開蓋,盡量保證單人單管,實現完全閉管操作;
6、實驗試劑應與樣品和PCR產物分開保存,不應放于同處;
7、PCR擴增實驗完成后及時將反應管取出,用一次性手套或者塑封袋將產物反應管包裹丟棄,保證管蓋緊閉;
8、實驗室自配試劑(去離子水、緩沖液等)和所有使用器具在使用之前均應高壓滅菌或紫外殺菌,尖、反應管等實驗耗材應一次性使用。
臨床基因擴增檢驗實驗室需要依據《機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》、《實驗室生物安全通用要求》、《生物安全實驗室建筑技術規范》等相關規定進行規劃建設。
1、二級生物安全實驗室的裝修
根據《人間的病原微生物名錄》,PCR實驗室所操作致病性生物因子大多屬于第二類病原微生物,實驗活動所需生物安全實驗室級別的生物危害等級為BSL-2。列舉裝修要點如下:
1、實驗室墻壁、頂板和地板應當光滑、易清潔、防滲漏并耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑,不得在實驗室內鋪設地毯和懸掛窗簾。實驗室的墻體,包括頂棚,應結構牢固、氣密性好、所有陰角采用圓弧形線條過渡;墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;墻體和吊頂建議使用彩鋼板。
2、地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
3、燈具要選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的特點。實驗室應設應急照明裝置,同時考慮合適的安裝位置,以保證人員安全離開實驗室。
4、有可靠的電力供應和應急照明。每個房間必須裝有紫外線殺菌燈,殺菌燈的安裝高度在1.8~2.1m之間。
5、傳遞窗內部安裝有紫外燈,供消毒用。
6、應配備足夠的固定電源插座,避免多臺設備使用共同的電源插座。應有可靠的接地系統,應在關鍵節點安裝漏電保護裝置或監測報警裝置。
7、實驗室臺(桌)柜和座椅等應穩固和堅固,邊角應圓滑。實驗臺面應防水,并能耐受熱、、酸堿、消毒劑及其他化學劑。一般采用環氧樹脂臺面。
8、實驗臺中的櫥柜和實驗臺應牢固,實驗臺、柜和其他設備之間應保持一定距離,以便清潔。
9、實驗室門為凈化門,應有可視窗并帶自動閉門器,實驗室的門與門不能相對開啟,必須錯位開啟。并達到適當的防火等級,門鎖及門的開啟方向應不妨礙室內人員逃生。
凈化車間在食品、行業的應用甚是廣泛,此外還有很多科技配件需要在凈化車間中完成,但凈化車間是分萬級的,那你知道GMP十萬級凈化車間又是什么“鬼”嗎?
GMP適用于制藥、食品等行業領域的強制性標準,要求企業從原料、設備、人員、包裝運輸等方面按照相關法規達到衛生質量要求,從而形成一套可操作的作業規范幫助企業改善企業衛生環境,及時發現在生產過程中存在的問題,并進行改善。
簡而言之就是GMP要求食品生產企業具備良好的生產設備、合理的生產過程、完善的質量管理、嚴格的檢測系統,以便保證產品質量符合法規要求。
根據美國聯邦頒布的標準,可將GMP凈化車間分為6個等級:1級、10級、100級、1000級、10000級、100000級。若等級只用塵粒數目來敘述,我們可以假設塵粒的尺寸為0.5um。
為保持無塵室的潔凈,通常要求進出人員具備一定的穿著規格:10000級、100000級,必須穿著長袍無塵衣、無塵鞋、帶帽子與面罩。1000級(含)以上穿著特殊潔凈連身衣、無塵鞋將全身包裹住,并帶上手套與面罩,所有生產流程需全部與外界進行隔離。
基本較低就是十萬級,百級的凈化車間是目前潔凈程度較高的潔凈室。