PCR實驗室中的氣溶膠污染來源于兩個過程:樣本制備過程和PCR擴增過程。
在樣本制備過程中,樣本液體面與空氣摩擦就可形成氣溶膠,在操作時比較劇烈地搖動反應管、開蓋時、吸樣時及加樣器的反復吸樣都可能形成氣溶膠而污染;PCR擴增過程可以引起實驗室中擴增產物的累積,通常一次典型的PCR擴增可以產生109拷貝的靶序列,如果氣溶膠化,甚至的氣溶膠都會含有106拷貝的擴增產物。
如果不加以控制,在短期內累積的氣溶膠化擴增產物就會污染實驗室中的試劑、儀器設備和通風系統,造成嚴重的實驗室污染,導致檢驗樣本出現假陽性結果,使臨床做出錯誤的判斷和決策,進而引發后續一系列的事故和恐慌。







①臨床標本中存在的大量待測微生物或待測靶核酸
②科研中得到的質粒
③以前分析研究的特定微生物或靶核酸
④大量存在于實驗環境中的特定微生物或靶核酸
⑤以前擴增產物的殘留污染,這也是 PCR 實驗室產生的將造成假陽性的“污染”。

PCR擴增可以引起實驗室中擴增產物的累積,通常一次典型的PCR
擴增可以產生109拷貝的靶序列,如果氣溶膠化,甚至的氣溶膠都會含有106拷貝的擴增產物。如果不加以控制,在短期內累積的氣溶膠化的擴增產物即會污染實驗室中的試劑、儀器設備和通風系統,從而造成嚴重的實驗室“污染”,出現大量的假陽性結果。
PCR實驗室應相對獨立,盡量避免與其他普通實驗套疊或者有通道上的交叉。看過一個圖,他們的PCR實驗室設置在檢驗科的里面,醫廢和標本的運送要穿過檢驗科的整個走廊,這種情況、物流、污物均在同一個通道,風險較高,應盡量避免。
設置區域:
PCR實驗室應設置以下區域:試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物分析區。這個4個區域在物理空間上必須完全獨立,各區域無論是空間上還是在使用中,應當始終處于完全的分割狀態,不能有空氣的直接相通。根據使用儀器的功能,區域可以適當合并。每個區域間設置傳遞窗,要求一側打開時另一側無法打開。4個區域應設置獨立的緩沖間,應設置可以通到四個操作區域的PCR走廊,在進入各區域前,應設置更衣間,每個區域的衣服可用不同顏色進行區分,在清潔區應設置洗澡間、衛生間、值班室。還應考慮到醫廢和標本的運送通道。