對于PCR實驗室的員工而言，在進入、使用與離開實驗室時都要遵守相關的操作規范。既然如此，要遵守哪些操作規范呢?下面，就為大家介紹PCR實驗室的員工操作規范。

PCR實驗室的員工操作規范員工在進入、使用與離開PCR實驗室時要遵守以下5條操作規范：

規范1：員工進入PCR實驗室前要先進入緩沖間，在工作服外加穿罩衣，戴好口罩、帽子和兩層手套，穿好鞋。進入緩沖區后要隨手關上外門，需要時打開照明按鈕。

規范2：員工在緩沖間內首先要打開緩沖間內的空調，再打開生物安全柜的按鈕，把實驗所需物品放入生物安全柜中，并且等待10分鐘后方能進入實驗室。

規范3：員工進入PCR實驗室后要先去工作區，打開照明按鈕與前玻璃門，把實驗所需物品放入實驗臺內，并且做好清潔物品與污染物品的區分。觀察負壓表指示數值，若數值不在預定范圍內要進行負壓調節。觀察溫濕度計，并填寫溫濕度計使用記錄。

規范4：員工進行實驗項目前必須把手臂放入生物安全柜內，待1分鐘后才能開始操作。實驗結束后要對實驗物品進行分類處理，并對工作臺面進行消毒。

規范5：工作人員在對實驗物品進行分類處理的同時還要打開排風，待風10分鐘后放下前玻璃門，打開生物安全柜紫外線燈進行消毒。離開實驗室前脫去第二層手套，填寫儀器使用記錄后才能離開。

PCR技術的問世使病原體檢測能夠快速、方便地進行。由于PCR技術假陽性率太高，只要有微量病原體存在就可得到陽性結果，這并不能作為診斷依據，只有當一定數量的病原體存在時才有臨床意義。因此，對模板準確定量顯得特別重要，應用熒光技術PCR就能夠快速、準確地得到結果。對于解決學檢測的“窗口期”問題，判斷疾病是否處于隱性或亞臨床狀態，以及檢測不能判定是現癥還是既往時，均可利用PCR進行確定。

示例：新型冠狀病毒核酸檢測。

方法學：熒光PCR法。

用途：用于體外定性檢測新型冠狀病毒的疑似病例、疑似聚集例患者、其他需要進行新型冠狀病毒診斷或鑒別。

檢測基因：新型冠狀病毒（2019-nCoV）ORFlab和N基因、E基因。

標本類型：上呼吸道標本：咽拭子、鼻拭子；下呼吸道標本：呼吸道抽取物、肺泡灌洗液樣本、肺組織活檢標本。

檢測流程：

（1）核酸檢測前的生物安全防護（工作人員個人三級防護的穿戴）→（2）樣本的滅活（56℃滅活30分鐘）→（3）樣本的核酸提取（手工、核酸提取儀）→（4）PCR體系的配制和模板加樣→（5）上機檢測及結果分析→（6）檢測后的消毒。

其他病原體檢測：HIV、甲乙丙肝、HPV、肺支、肺衣、EB病毒、腺病毒、胞病毒、甲乙流、埃博拉病毒、B族鏈球菌。

適合開展的醫院和：兒童醫院、婦幼、兒檢所、第三方、各種級別的有需求的醫院。

需要注意以下問題：

實驗室使用的基因擴增儀，熒光定量PCR儀都是高精度儀器。一旦儀器出現一些溫度或者檢測上的小偏差，則很可能對實驗結果產生較大的影響。因此，學會日常保養和維護是尤為重要的。

1、儀器安置

儀器應安放在濕度較低、灰塵較少并遠離水源和熱源的地方，無腐蝕性氣體或強磁場干擾。

環境溫度建議在18~35℃之間。儀器之間應保持50cm 以上距離，降低儀器之間的影響。

2、樣品臺、熱蓋定期清潔

用95%乙醇配合棉簽、無塵布等工具，清潔樣品臺。之后運行PCR儀，設定保持溫度為50℃，約5~10min，讓殘余液體揮發去除。另外，熱蓋也應該用酒精或純水定期清洗，確保熱蓋清潔，溫控性能良好。對于熒光定量PCR，清潔樣品臺和熱蓋的同時，去除灰塵等雜物，保證光路清潔，降低信號干擾。

3. 使用前預熱

老款的PCR儀的性能比不上新款儀器，使用前需要進行預熱，不僅對儀器維護有好處，還能節約實驗時間。新款的儀器升溫快，但還是建議能在進行實驗前預熱2min，這樣可以有效延長儀器的使用壽命。

4. 定期運行維護

1.PCR儀器需要定期檢測，視制冷方式而定一般半年至少一次。

2.PCR反應的要求溫度與實際分布的反應溫度是不一致的，當檢測發現各孔平均溫度差偏離設置溫度大于1～2℃時，可以運用溫度修正法糾正PCR實際反應溫度差。

3.PCR反應過程的關鍵是升、降溫過程的時間控制，要求越短越好，當PCR儀的降溫過程超過60s，就應該檢查儀器的制冷系統，對風冷制冷的PCR儀要較地清理反應底座的灰塵；對其他制冷系統應檢查相關的制冷部件。

4.一般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時，不要輕易打開或調整儀器的電子控制部件，必要時要請人員修理或利用儀器電子線路詳細圖紙進行維修。