對于PCR實驗室的員工而言，在進入、使用與離開實驗室時都要遵守相關的操作規范。既然如此，要遵守哪些操作規范呢?下面，就為大家介紹PCR實驗室的員工操作規范。

PCR實驗室的員工操作規范員工在進入、使用與離開PCR實驗室時要遵守以下5條操作規范：

規范1：員工進入PCR實驗室前要先進入緩沖間，在工作服外加穿罩衣，戴好口罩、帽子和兩層手套，穿好鞋。進入緩沖區后要隨手關上外門，需要時打開照明按鈕。

規范2：員工在緩沖間內首先要打開緩沖間內的空調，再打開生物安全柜的按鈕，把實驗所需物品放入生物安全柜中，并且等待10分鐘后方能進入實驗室。

規范3：員工進入PCR實驗室后要先去工作區，打開照明按鈕與前玻璃門，把實驗所需物品放入實驗臺內，并且做好清潔物品與污染物品的區分。觀察負壓表指示數值，若數值不在預定范圍內要進行負壓調節。觀察溫濕度計，并填寫溫濕度計使用記錄。

規范4：員工進行實驗項目前必須把手臂放入生物安全柜內，待1分鐘后才能開始操作。實驗結束后要對實驗物品進行分類處理，并對工作臺面進行消毒。

規范5：工作人員在對實驗物品進行分類處理的同時還要打開排風，待風10分鐘后放下前玻璃門，打開生物安全柜紫外線燈進行消毒。離開實驗室前脫去第二層手套，填寫儀器使用記錄后才能離開。

這些常見物品的外表面容易被核酸和細菌污染，主要查看這兩個指標。

（1）表面核酸污染：用沾濕的拭子擦拭上述物品的外表面，然后浸泡到純水中10min，吸取純水作為模板進行擴增，qPCR無擴增為合格。

（2）移液器內腔核酸污染：對于常用的移液器的內部，可使用無濾芯的吸頭在陰性純水中吹吸10次后，吸取純水作為模板進行擴增，qPCR無擴增為合格。

（3）表明細菌污染：用沾濕的無菌拭子擦拭上述物品的外表面，劃瓊脂平板，每個平板的菌落數不應超過一定數量（我也不確定多少合適，由于不要求無菌操作一定會有細菌，但是也不應該太多）。

非瘟和新冠后一下子新增了很多核酸檢測實驗室，早期大家關注的點都在設施和硬件上，但是一個檢測實驗室開展大量檢測工作之后，檢測中弱的環節決定檢測的質量。我們也需要將精力放在檢測中的每個細節上。

需要注意以下問題：

實驗室使用的基因擴增儀，熒光定量PCR儀都是高精度儀器。一旦儀器出現一些溫度或者檢測上的小偏差，則很可能對實驗結果產生較大的影響。因此，學會日常保養和維護是尤為重要的。

1、儀器安置

儀器應安放在濕度較低、灰塵較少并遠離水源和熱源的地方，無腐蝕性氣體或強磁場干擾。

環境溫度建議在18~35℃之間。儀器之間應保持50cm 以上距離，降低儀器之間的影響。

2、樣品臺、熱蓋定期清潔

用95%乙醇配合棉簽、無塵布等工具，清潔樣品臺。之后運行PCR儀，設定保持溫度為50℃，約5~10min，讓殘余液體揮發去除。另外，熱蓋也應該用酒精或純水定期清洗，確保熱蓋清潔，溫控性能良好。對于熒光定量PCR，清潔樣品臺和熱蓋的同時，去除灰塵等雜物，保證光路清潔，降低信號干擾。

3. 使用前預熱

老款的PCR儀的性能比不上新款儀器，使用前需要進行預熱，不僅對儀器維護有好處，還能節約實驗時間。新款的儀器升溫快，但還是建議能在進行實驗前預熱2min，這樣可以有效延長儀器的使用壽命。

4. 定期運行維護

1.PCR儀器需要定期檢測，視制冷方式而定一般半年至少一次。

2.PCR反應的要求溫度與實際分布的反應溫度是不一致的，當檢測發現各孔平均溫度差偏離設置溫度大于1～2℃時，可以運用溫度修正法糾正PCR實際反應溫度差。

3.PCR反應過程的關鍵是升、降溫過程的時間控制，要求越短越好，當PCR儀的降溫過程超過60s，就應該檢查儀器的制冷系統，對風冷制冷的PCR儀要較地清理反應底座的灰塵；對其他制冷系統應檢查相關的制冷部件。

4.一般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時，不要輕易打開或調整儀器的電子控制部件，必要時要請人員修理或利用儀器電子線路詳細圖紙進行維修。