（1）患者在病房清潔、消毒手術部位后，換上經消毒的衣服、褲子并戴帽子至手術室。
（2）使用手術室對接車接送。無對接車者，在手術室入口處將患者換到手術室經清潔處理過的平車上。車輪通過粘附墊吸塵處理后推入手術間。
（3）皮膚消毒:為使手術部位的皮膚達到較寬的殺菌范圍，應采用兩種或兩種以上的混合消毒液消毒。
（4）鋪無菌草:無菌單應采用不利于細菌生存的非織物材料。鋪無菌單時應根據手術室空氣流動方向采用不同方式:垂直層流手術間鋪置的無菌單應垂直地板，如不垂于地板，就會引起空氣紊流，使污染物質從地板掀起;水平層流間手術鋪置地無菌單，垂在手術臺前后端的部分不應超過手術臺至地面距離的1/3。如果垂至地板，就會引起空氣紊流，使污染物質從地板飛揚起來。而在手術臺兩側的無菌單是可以垂至地板的。
（5）限制在手術臺上翻動。如確實有必要翻動蓋單時，應盡可能輕柔，以免帶菌飄浮物沉降于無菌手術區內。
（1）手術人員應進行鼻咽部細菌學監測。如患有上呼吸道或（如、癰）一律不能進入手術間。
（2）進入手術室更鞋，進水平層流間穿經消毒處理的、遮住整個腳和腳踝部分的膠靴。
（3）更換非織物材料的衣、帽。采用阻菌力強的口罩。
（4）進手術室內走廊前經風淋室行風淋，吹除塵埃。
（5）洗手，手臂消毒。
（6）穿無菌手術衣。手術衣為非編織材料，背后面為搭接式，腿部盡可能地被遮住。
（7）戴無菌手套，因手套可能有微孔，為防止手術污染，應戴兩層手套。
（8）嚴格控制參觀人數，根據手術大小合理安排。參觀者應在的區域進行活動，不得任意穿行，更不允許由污染手術間直接進入無菌手術間。手術間內人數和人員的活動保持的限度，以防止紊生，引起污染。
◆制度管理，預防理念貫穿全過程
◇樹立“以患者為中心”；
◇制定相關制度，執行、評估、完善；
◇預防貫穿診療全過程
◆ 強化無菌操作與預防
◇無菌操作貫穿到所有的共同媒介物（用品、器械等）、醫務人員（手、鼻等部位）及的術前、術中和術后各環節的控制；
◇處于潔凈氣流的風幕中心；
◇防止回風受阻；
◇職業防護與屏障理念
◆做好各類技術參數的監控 ◇溫度（20℃~25 ℃ ）
◇濕度（RH：40%~60%）
◇保持正壓差，高潔凈度＞低潔凈度 ◇自凈時間
◆過濾裝置的管理
◇空氣過濾裝置定期保養，提倡維護；
◇新風口裝置1w清洗1次
◇初效、回風口裝置1-2w清洗1次；
◇過濾裝置1-2y更換1次；
◇送、回風管道1/2-1y清理1次 ◆嚴格控制入室人數
◇過多的人數超過潔凈室的自凈能力；
◇過多的人數影響新風量的不足；
◇過密的人墻使塵埃反彈至手術野
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