1、實驗應在超凈工作臺或者生物安全柜內進行;
2、實驗的過程中選擇尺寸的手套并能及時更換,在進出不同實驗區域或進行模板操作后都應更換實驗服、口罩、帽子及手套,以避免不同實驗區交叉污染;
3、裝有PCR試劑的反應管在打開之前應先瞬時離心,將管壁及管蓋上的液體離至管底,降低污染手套或加樣器的風險;謹慎開啟反應管,防止管內液體濺出或形成氣溶膠導致污染;需要高溫加熱的樣本,可采用封口膜進行PCR管蓋密封,避免管蓋應受熱而發生彈開;
4、吸加試劑和模板的操作應嚴格按照規范要求進行,遵守“慢吸快打”原則,盡量一次性完成,忌多次抽吸,以避免氣溶膠產生的交叉污染;
5、PCR試劑建議小量分裝,以減少反復凍融、重復取樣次數和反復使用過程中的試劑污染;多樣本PCR反應時,先配制反應混合液分裝至反應管中,加入樣本核酸,請勿同時開蓋,盡量保證單人單管,實現完全閉管操作;

6、實驗試劑應與樣品和PCR產物分開保存,不應放于同處;
7、PCR擴增實驗完成后及時將反應管取出,用一次性手套或者塑封袋將產物反應管包裹丟棄,保證管蓋緊閉;
8、實驗室自配試劑(去離子水、緩沖液等)和所有使用器具在使用之前均應高壓滅菌或紫外殺菌,尖、反應管等實驗耗材應一次性使用。







PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。 各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。
臨床PCR實驗室設計的“16字口訣”:各區獨立、注意風向、因地制宜、方便工作。

(1)在物理空間上,必須是完全相互獨立的,各 區域無論是在空閑還是在使用中,應始終處于 完全的分隔狀態; (2)不能有空氣的直接相通。
1.實驗室空調通風系統設計及壓力控制
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。

2.污染的預防與控制
PCR實驗室設計的問題是如何避免污染。在實際工作中,常見的有以下幾種污染類型:擴增產物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發生污染,實驗就必須停止,直到找到污染源為止,而且實驗結果必須作廢,需重新進行實驗。所以發生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣,浪費人力物力。因此要避免污染,首先應是預防,而不是排除。